承建 细胞实验室 细胞贮存室 制备室

干细胞实验室平面布局

⽆菌操作区

⽆菌操作区是只限于细胞培养及其他⽆菌操作的区域，能与外界隔离，不能穿⾏或受其他⼲扰。在⼀般环境的空⽓中，由于存在许多尘埃和杂菌，较易造成污染。因此，接种⼯作要在空⽓经过灭菌的环境⾥进⾏，⼩规模的⽆菌环境可利⽤超净⼯作台创造，⼤规模的需建⽆菌室。理想的⽆菌操作室应划为三部分：

a) 更⾐室―供更换⾐服、鞋⼦及穿戴帽⼦和⼝罩。

b) 缓冲间―位于更⾐间与操作间之间，⽤于准备⼯作，还有防⽌污染的作⽤，以保证操作间的⽆菌环境，同时可放置恒

温培养箱以及必需的⼩型仪器。

c) ⽆菌操作间―⽆菌操作间则专⽤于⽆菌操作、细胞培养，其⼤⼩要适当，且其顶部不宜过⾼以保证紫外线的灭菌效果；墙壁光滑⽆死⾓以便清洗和消毒，⽆菌操作间容积⼩且为密闭式，⼀般⽆菌操作间的空⽓消毒⽤紫外线灯，有的实验室使⽤⽆臭氧紫外线消毒器或电⼦消毒灭菌器。

净化⼯作台：操作简单，安装⽅便，占⽤空间⼩且净化效果很好。⼀般细菌培养室使⽤的净化⼯作台主要有两种：

a)侧流式或称垂直式 b)外流式或称⽔平层流式。

孵育区

孵育区也称培养区，本区对⽆菌的要求虽不⽐⽆菌区严格，但仍需清洁⽆尘，因此也应设置在⼲扰少⽽⾮来往穿⾏的区域。孵育可在孵箱或可控制温度的温室中进⾏，后者费⽤⾼，⼀般实验室多采⽤孵箱进⾏⼯作。

制备区

制备区主要进⾏培养液及有关培养⽤的液体等的制备。应设有试剂柜、实验台和上⽔道、电源等，配备的主要仪器设备有⽔纯化装置、天平、微波炉、pH计、抽⽓泵、电炉、培养分装器、各种规格的培养瓶、培养⽫、移液管、烧杯、量筒、容量瓶等。在有天平、pH计、磁⼒拌器等设备下完成制备以后，应在⽆菌操作台进⾏过滤除菌。液体制备直接关系组织细胞养的成败，因此必须严格⽆菌操作。

储藏区

储藏区主要存放各类冰箱、⼲燥箱、液氮罐、⽆菌培养液、培养瓶等，此环境也需要清洁⽆尘。为了保存细胞，特别是不易获得的突变型细胞或细胞株，要将细胞冻存。冻存的温度⼀般为液氮温度-196℃。

细胞的冻存过程需要⼀系列程序降温，⼀般为4 ℃下存放30min。转放-20 ℃ 1 h，再转⼊-80—-70℃过夜，之后才可以转移到液氮内(-196℃)。因此储存区必须配备冰箱、低温冰箱、超低温冰箱和液氮罐等设备。

清洗和消毒灭菌区

清洁和消毒灭菌区应与其他区域分开，主要进⾏所有细胞培养器⽫的清洗、准备、消毒及三蒸⽔制备等⼯作，应备有⾼压蒸汽灭菌锅、细菌过滤设备、电热⼲燥箱、消毒柜、排风设备等。

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