CGT 细胞制备区常规洁净等级怎么配置

一、标准配置（开放式制备，项目常用、核查最稳妥）

1. A 级（ISO5，百级，局部操作点）适用：细胞开盖、分离、洗涤、转导、收获、制剂分装、无法除菌过滤的培养基配制、开放状态下物料转移；一般在生物安全柜、层流罩、无菌隔离器内部。A 级必须动态监测粒子与微生物。

2. B 级（ISO7，万级，A 级的背景房间）适用：A 级操作台所在的制备主房间、二更、A 级配套缓冲；房间整体 B 级，人员在 B 级环境内操作 A 级设备。

一句话：开放暴露操作 = B 级背景下 A 级，这是 CGT 商业化项目经典配置。

3. C 级（ISO8，十万级）适用：可除菌过滤的配液、载体纯化、密闭培养（透气培养瓶）、一更、物料缓冲、洁净器具存放间；如果项目全程用密闭管路、封闭袋系统，仅穿刺取样这种小暴露操作，可采用C 级背景下局部 A 级，是现在很多新项目降本方案。

4. D 级适用：必须密闭系统内部生产、全程管路密闭转移，产品不暴露于房间空气（隔离器密闭灌装、一次性密闭工艺），风险评估充分后，背景环境可用 D 级；需要在风险评估文件中说明密闭完整性验证方案，属于条件放宽，不能直接默认使用。

二、配套辅助洁净区常规搭配

• 一更、脱外包缓冲：D 级或非洁净（看流线）

• 二更、A 级前缓冲：跟随背景等级（B 级方案则缓冲 B 级；C 级方案缓冲 C 级）

• 洁净物料暂存：同背景级别（B/C）

• 成品冻存区（液氮 / 超低温）：C 级或 D 级，只做密闭存放，不打开细胞产品

• QC 微生物限度：B 级背景 A 级；支原体、阳性对照是独立负压房间，不套用制备区等级

三、压差梯度参考（B 级方案）

B 级制备房间 ＞ B 级缓冲 ＞ C 级前区 ＞ 普通走廊（≥10Pa）；阳性、支原体、样本拆包区为负压。

四、两种方案对比（选型要点）

✅ 方案 1：B 级背景 + 局部 A 级（传统主流，适合开放式操作、一次性系统频繁开盖，CDE 核查接受度最高，广州沃霖多数申报类 CGT 项目选用）✅ 方案 2：C 级背景 + 局部 A 级 / D 级背景（全密闭袋式、隔离器工艺，适合自动化封闭流程，前期要做好风险评估、密闭性验证）❌ 不建议：直接做成普通 C 级房间、无局部 A 级，开放制备，属于核查重大缺陷