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干细胞无菌实验室的制备区与培养区如何布局

更新时间:2025-12-09   点击次数:32次

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干细胞无菌实验室制备区与培养区布局需遵循 “单向流程、分级隔离、环境适配、污染阻断" 核心原则,兼顾干细胞活性维持与无菌防护,实现从细胞制备到培养的闭环管控,具体布局方案如下:
  1. 整体空间层级与相对位置

    • 两区需集中布置在实验室核心无菌区域(A/B 级洁净区),整体位于非无菌辅助区的内侧、下风侧(按 HVAC 气流走向),与外部区域用双层气密隔断 + 三级缓冲净化通道隔离。

    • 按 “制备区→中转缓冲→培养区" 单向线性排布 ,制备区靠近无菌物料入口,培养区深入核心无菌区内侧,两区直线距离≥3m,且中间设专用中转缓冲间,杜绝逆向动线。

  2. 制备区布局要点

    • 整体洁净等级≥ISO 7 级,局部操作区达 ISO 5 级;维持 + 10~15Pa 微正压(相对中转缓冲间);配备独立排风,排出的气溶胶经 H14 高效过滤器处理;地面采用无缝抗菌环氧自流平,墙角做 R50mm 圆弧处理,无卫生死角。

    • 功能分区细化

    • 环境与设施要求

    1. 原料处理工位:紧邻无菌物料传递窗,用于干细胞原料(脐带、骨髓等)的无菌拆解、清洗,配备生物安全柜(二级)、无菌操作台,台面设 0.22μm 除菌过滤器接口,保障原料初始无菌。

    2. 细胞分离 / 纯化工位:与原料处理工位相邻且单向衔接,配备低温离心机、流式细胞仪,区域维持局部垂直单向流(风速 0.36-0.54m/s),温度控制在 20-25℃,避免温度波动影响细胞活性。

    3. 试剂配制 / 分装工位:独立设置在制备区边缘,与细胞操作工位用矮隔断分隔,配备无菌移液器、分装仪,试剂经双扉灭菌传递窗转入,且需现配现用,减少污染风险。

  3. 培养区布局要点

    • 整体洁净等级≥ISO 7 级,培养箱周边局部达 ISO 5 级;维持 + 15Pa 微正压(相对制备区),确保气流从培养区流向制备区;温度控制在 22±0.5℃、湿度 45%-60%,避免环境波动影响细胞贴壁与增殖;配备备用 UPS 电源,保障培养箱断电后短时温控稳定。